天博

NRPB42L Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

发布日期:2018-10-27 阅读次数:2771

品  名:Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

英文名:Strep-Tactin NUPharose Fast Flow, Strep-Tactin NUPharose FF

目录号:NRPB42L、NRPB42S(预装柱)

规  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱,5 ml预装柱,特殊规格订制

运  输:2 ~ 25℃,常压、避光

贮  存:20%乙醇,2 ~ 8℃

保质期:3年


相关介绍: 

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF是一种将Strep-Tactin键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质,主要用于纯化Strep II标签蛋白。Strep II标签为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1 kDa左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。


本产品的配基Strep-Tactin是链霉亲和素(Streptavidin)的突变体,与链霉亲和素相比,Strep-Tactin对Strep II标签的亲和能力至少强10倍以上,能够在温和的条件下与Strep II融合蛋白结合和解离。由于Strep-Tacin对Strep II标签具有高度特异性,一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。


Strep II标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,一般不会影响蛋白质的性质。如Strep II标签蛋白质能耐受碱性条件,也可用碱液洗脱,比如10 mM NaOH等。

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF能耐受较高的碱性条件,可以用0.5 M NaOH进行再生清洗和去除热源等。


另外,2-(4-羟基苯唑)苯甲酸(HABA)也可用于凝胶再生,过量的HABA能以竞争的方式替换脱硫生物素,但在无HABA的缓冲液中, Strep-Tactin与HABA会发生解离,从而使HABA脱落,实现再生。


技术指标:

基质

4%琼脂糖凝胶微球

配基

Strep-Tactin

配基密度

≥5 mg/ml

填料粒径

60 ~ 180 μm

最大流速

800 cm/h

推荐流速

20 ~ 100 cm/h

pH稳定性

短时间pH 2 ~ 13;长时间pH 4 ~ 11

耐反压

0.3 MPa

载量

≥6 mg/ml Strep II标签蛋白


使用方法:

1 推荐缓冲液

纯化Strep II标签蛋白

结合缓冲液:100 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,1 mM EDTA,pH 8.0;

       或20 mM NaH2PO4,280 mM NaCl,6 mM KCl,pH 7.4


洗脱缓冲液:结合缓冲液 + 2.5 mM 脱硫生物素;

       或10 mM NaOH


再生缓冲液:0.5 M NaOH;

       或结合缓冲液+1 mM HABA


2 样品准备

上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45 μm滤膜或高速离心去除不溶物。


3 样品纯化

3.1 平衡:取适量的Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF装入合适的层析柱中,用蒸馏水清洗5个柱体积去除保存液,再用结合缓冲液平衡5个柱体积,建议流速为100 cm/h。

3.2 上样:将准备好的样品上柱,建议流速为20 ~ 100 cm/h,可根据实际结合情况选择流速,能获得较好的效果。

3.3 再平衡:上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上,或平衡至基线,洗去杂质,推荐流速为100 cm/h。

3.4 洗脱:用洗脱缓冲液洗10 ~ 20个柱体积,建议流速为100 cm/h,收集的洗脱液应立即调节pH至稳定范围,并根据需要置换缓冲液。

3.5 NaOH再生:洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3 ~ 5个柱体积,并用0.5 M NaOH再生3 ~ 5个柱体积,再用蒸馏水清洗至中性,用20%乙醇保存柱子,或进行下一次纯化。

3.6 HABA再生:用脱硫生物素洗脱目的蛋白的,还可以用HABA缓冲液再生,一般用HABA的结合缓冲液洗15个柱体积,再用结合缓冲液洗30个柱体积,然后可以用20%乙醇保存柱子,或进行下一步纯化。HABA上柱后凝胶颜色会变为红橙色,在结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色,这种再生方式一般使用体积会大些。

导购指南

中文名

英文简称

货号

规格

产品描述

重力预装柱

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF重力预装柱

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF pre-packed column

NRPB42S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB42S-Z41

4*1mL

4支*1ml

NRPB42S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB42S-Z25

2*5mL

2支*5mL

AKTA中压预装柱

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF中压预装柱

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF pre-packed column

NRPB42S-Y11

1*1mL

1支*1ml

NRPB42S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB42S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB42S-Y25

2*5mL

2支*5mL

填料

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

NRPB42L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB42L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB42L-100

100mL

1瓶*100ml

NRPB42L-500

500ml

1瓶*500ml

注:天博生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


  1. 天博
      友情链接:yabo官网  亚博下注  BOB官方  天博  体育盘口  
      天博地图 地图